核酸提取和纯化操作指南与注意事项
核酸是生命的最基本物质之一，可分为DNA和RNA两类，广泛存在于动物、植物细胞、微生物等所有生命体内。不仅起着储存和传递遗传信息的作用，而且在蛋白质的生物合成上也占重要位置，因而在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。
核酸的提取技术广泛应用于基础生命科学研究。通常，RNA比DNA更难提取。一方面，RNA是单链结构，不像DNA双链结构那么稳定。同时，广泛存在的内外源性的RNA酶可能会对提取的RNA样本产生降解作用。


故核酸提取和纯化实验当中，为了获得高得率，应当注意以下事项
1）核酸提取制备尤其是RNA制备的关键是要抑制细胞中的RNA分解酶和防止所用器具及试剂中的RNA分解酶的污染。EP管及Tip头都要用0.1%处理(0.1% DEPC浸泡过夜后高压蒸气灭菌)。用于RNA实验的试剂须使用DEPC水处理灭菌后的玻璃容器盛装，使用的无菌水须用0.1%的DEPC处理后再进行高温高压灭菌。

2）最好在超净台内操作，如无条件，最起码要用75%的酒精棉球搽拭干净实验台面。 

3）提取时操作带一次性手套、口罩等，小心、细致、晃动及每次移液要轻。在操作过程中避免讲话等。这样做的目的：一是小心RNAse的污染降解RNA；二是动作过度暴力破坏RNA的完整性。 

4）电泳液需新鲜配制。电泳槽和模具需预先进行处理。
 
5）RNA电泳应该是做甲醛变性电泳，但是一般的琼脂糖电泳也可以，不过需要稍微加大上样量，并且为了减少外界RNAse对RNA的降解,跑电泳的时间越短越好,跑完电泳立刻观察。

6）需要用EB染色，Genefinder染色效果不好，其对双链DNA的效果好。 

7）器材的处理：尽量使用一次性塑料器皿，若用玻璃器皿，应在使用前按下列方法进行处理。 




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