常见细胞污染与解决方案
418 人阅读发布时间:2020-12-08 16:26
凡在细胞培养环境中混入对细胞生长以及生存有害的成分以及造成细胞不纯的异物都应视为污染。
一般情况下,细胞污染根据污染源的不同,可分为物理污染、化学污染和生物污染。
物理污染
物理污染是细胞培养过程中最容易被实验人员忽视的一种污染,往往是由一些放射性物质、辐射、或者是温度和其他物理环境的变化引发的。
这些物理性的变化会改变细胞培养体系中的一些生化成分,进而影响细胞的生长,导致细胞生长受抑制甚至死亡,或者细胞的代谢发生变化。
如何避免物理污染的产生?
通过合理设计细胞房布局和规范实验操作可以大大降低物理污染的概率。
一些会引发机械震动的设备如涡旋振动仪、离心机等,建议不要放在二氧化碳培养箱附近。常用试剂按照存放要求(4℃或者-20℃的温度条件下,某些特殊试剂有避光的要求)置于固定的位置,并且避免周围有同位素或者其他放射性物质的存在。
培养箱在使用过程中,尽量避免频繁开关门以免造成二氧化碳浓度和温度的长时间或者大幅度的波动。处理细胞(如进行传代操作)时,也不宜长时间让细胞处于室温状态,影响其生长。
用于细胞培养的培养基、缓冲液、胎牛血清等,一般情况下需保证温度在37℃左右时再用于细胞,以免温度过低损伤细胞。
化学污染
化学污染往往存在于培养环境的各种介质中,是造成细胞培养过程中常见的污染之一。培养介质中的杂质、水、试剂、耗材、以及常用的玻璃器皿等都可能造成化学污染。
一些常用的玻璃器皿,清洗不到位也会导致一些清洗剂的残留,进而影响其盛放试剂的纯净度。
在细胞培养过程最常使用到的水(包括蒸馏水、双蒸水、超纯水等),或多或少都会存在一些杂质。即使是去除了金属离子、内毒素等的超纯水,也会随着放置时间纯净度会下降,在实验室中尽量需要现配现用。另外,大部分自行配制的试剂溶液,依据性质不同需要通过过滤或者高温灭菌的方式除去其中的杂质。
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