技术干货 | 神经环路研究中在体钙信号的检测方法
1219 人阅读发布时间:2020-12-03 17:21
对清醒自由活动动物神经系统的研究,是当代神经科学研究中一个至关重要的问题。通过检测神经元活动相关的钙信号,我们能够更好地理解复杂的神经回路。
近年来,包括双光子显微镜,微型显微镜和光纤记录法在内的技术发展,我们能够对动物的钙信号变化进行实时检测。利用遗传编码的钙指示剂可以实现在体细胞内钙活动的可视化。研究人员可使用工程化的荧光蛋白,标记特定细胞类型的神经元,通过记录荧光信号的变化来反映细胞内钙离子浓度的变化,进而表征神经元的活动。
接下来我们就一起来看看这三种体内钙信号记录方法的优缺点。
A双光子钙成像、B微型显微镜(单光子钙成像)、C光纤记录法
双光子钙成像
在过去,大多数的体内钙成像是在双光子显微镜下完成的。双光子显微镜是一种荧光成像技术,其中两束相干激光通过显微镜的目镜聚焦到一个由点扩散函数定义的点上,类似于共聚焦显微镜选择性地激发类荧光分子。双光子显微镜和共聚焦显微镜的主要区别在于光吸收和荧光发射的物理过程。
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