在上一期的专栏里，我们对荧光成像和生物发光的基本原理进行了对比。同时也留下了几个问题：针对我的课题，生物发光和荧光成像哪个好？什么情况下选择生物发光，什么情况下选择荧光成像。别急，今天将为大家解答关键问题：荧光成像和生物发光成像的优缺点是什么？ 相比生物发光成像，荧光成像技术的优势主要表现在：

1. 荧光蛋白及荧光染料的标记能力更强。

荧光标记分子种类繁多，包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等，可以对基因、蛋白、抗体、化合药物等进行标记。应用范围极广，可以对样本进行多色标记，一个样本同时获得多种细胞或药物的分布。

1. 信号强度高

由于荧光成像的光子强度较生物发光更强，持续时间长，对CCD的灵敏度要求相对较低，不需要必须配备低温冷CCD即可获得清晰的成像结果，节省实验成本和购置成本。

1. 实验成本低，成像过程简单

相比生物发光成像，成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射就可以发出特定波长的发射光。只要荧光基团稳定，就可实现随时激发随时发光随时检测。

1. 从活体到离体均可成像

相比生物发光只能在活细胞内才会产生发光。荧光蛋白或荧光染料只需要保持荧光基团稳定即可稳定发光。可以在活体或离体组织器官进行观察，在实验前期荧光材料制备阶段，可以直接在EP管中进行成像观察。

1. 应用范围广

相比生物发光成像，荧光成像技术应用范围极广。在肿瘤生长与转移、药物的分布与代谢、纳米颗粒的靶向性与代谢、植物基因的表达、生物相容性材料开发、新型标记技术的开发等多个研究中均可用到荧光成像技术。​​​​​​​ 相比荧光成像，生物发光成像的主要优势表现在：
1、特异性强，无自发荧光
以荧光素酶作为体内报告源的生物发光方法，特异性极强。由于动物本身没有任何自发光，使得生物发光具有极低的背景和极高的信噪比。
2、高灵敏度
由于生物体内很多物质在激发光的照射下也会发出荧光，这些非特异性荧光背景会影响检测灵敏度，荧光成像的灵敏度最高可在动物体内检测到约10⁴细胞，而生物发光具有在动物体内监测10²数量级细胞的灵敏度。
3、检测深度更高
对于需要在深部组织下进行的研究（检测的深度在3~4cm），应用生物发光是最佳的选择。

4、精确定量
由于荧光素酶基因是插入细胞染色体中稳定表达的，单位细胞的发光数量、发光条件相对稳定。即使标记细胞在动物体内有复杂的定位，亦可从动物体表的信号水平测量出发光细胞的相对数量。
荧光成像和生物发光技术，是互为补充，分别满足不同的研究领域。对于不同的研究，可根据两者的特定及实验要求，选择合适的方法。